噻唑蓝标准品用途及试验步骤介绍
更新时间：2020-09-18 点击次数：703次
噻唑蓝标准品常用于基于MTT检测方法的细胞活力、细胞增殖或细胞毒性检测。因为MTT具有正电荷，它可以穿过细胞膜并被线粒体还原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有机溶剂。
噻唑蓝标准品用途：
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2.细胞增殖及细胞活性测定。检测原理如上所述，根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强(如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)。
实验步骤：
1：接种细胞：用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul.
2:培养细胞：同一般培养条件，培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3：呈色：培养3-5天后，每孔加噻唑蓝标准品溶液(5mg/ml用PBS配制，pH=7.4)20ul.继续孵育4h
终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ulDMSO，振荡10min，使结晶物充分融解。
4：比色：选择490nm波长，在酶标仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
在线客服