噻唑蓝标准品检测原理究竟是怎样的,一文读懂
更新时间:2021-05-19 点击次数:470次
噻唑蓝标准品是一种黄色粉末。有吸湿性。对光敏感。溶于水和乙醇,微溶于乙酸乙酯,不溶于氯仿。熔点171℃(分解)。较大吸收波长378nm。
性状:噻唑蓝标准品微溶于甲醇中,但难溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能将其*溶解。195℃溶于水或DMSO。常配制成5mg/ml的储备液。熔点:195℃(分解)
用途:生化研究。常用于基于MTT检测方法的细胞活力、细胞增殖或细胞毒性检测。因为MTT具有正电荷,它可以穿过细胞膜并被线粒体还原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有机溶剂。脱氢酶的检测,生化研究中酶活力的测定,测定NADH2、NADPH2和心肌黄酶(Diaphorase)。
噻唑蓝标准品检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值),来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。