对党参炔苷对照品薄层板制备操作方法
更新时间:2018-06-25 点击次数:698次
对党参炔苷对照品薄层板制备操作方法
药理药效:具有抗癌、抗菌、抗炎、镇静、降压作用,调节前列腺素代谢。
用途:用于含量测定、鉴别、药理实验、活性筛选等.
对党参炔苷对照品操作方法
(1)党参炔苷对照品薄层板制备
市售薄层板临用前一般应在110℃活化30分钟。聚酰胺薄膜不需活化。铝基片薄层板可根据需要剪裁,但须注意剪裁后的薄层板底边的硅胶层不得有破损。如在存放期间被空气中杂质污染,使用前可用甲醇或二者的混合溶剂在展开缸中上行展开预洗,110℃活化,置干燥器中备用。
自制薄层板除另有规定外,将1份固定相和3份水(或加有黏合剂的水溶液)在研钵中按同一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干后,在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度,在反射光及透视光下检视,表面应均匀、平整、光滑,无麻点、无气泡、无破损及污染。
(2)党参炔苷对照品点样除另有规定外,在沽净干燥的环境,用毛细管或配合相应的半自动、自动点样器械点样于薄层板上,一般为圆点状或窄细的条带状,点样基线距底边10~15mm,板一般基线离底边8~10mm。圆点状直径一般不大于3mm,板一般不大于2mm;接触点样时注意勿损伤薄层表面。条带状宽度一般为5~10mm。板条带宽度一般为4~8mm,可用半自动或自动点样器械喷雾法点样。点间距离可视斑点扩散情况以相邻斑点互不干扰为宜,一般不少于8mm,板供试品间隔不少于5mm。
(3)展开将点好供试品的薄层板放入展开缸中,浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜,密闭。除另有规定外,一般上行展开8~15cm,薄层板上行展开5~8cm。溶剂前沿达到规定的展距,取出薄层板,晾干,待检测。
展开前如需要溶剂蒸气预平衡,可在展开缸中加入适量的展开剂,密闭,一般保持15~30分钟。溶剂蒸气预平衡后,应迅速放入载有供试品的薄层板,立即密闭,展开。如需使展开缸达到溶剂蒸气饱和的状态,则须在展开缸的内侧放置与展开缸内径同样大小的滤纸,密闭一定时间,使达到饱和再如法展开。必要时,可进行二次展开或双向展开。
(4)党参炔苷对照品显色与检视供试品含有可见光下有颜色的成分可直接在日光下检视,也可用喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂显色,或加热显色,在日光下检视。有荧光的物质或遇某些试剂可激发荧光的物质可在365nm紫外光灯下观察荧光色谱。对于可见光下无色,但在紫外光下有吸收的成分可用带有荧光剂的硅胶板(如硅胶GF254板),在254nm紫外光灯下观察荧光板面上的荧光猝灭物质形成的色谱。
(5)记录薄层色谱图像一般可采用摄像设备拍摄,以光学照片或电子图像的形式保存。也可用薄层扫描仪扫描记录相应的色谱图。